Авторы:
Д. А. Старикова,
Т. И. Кузьмина
Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения животных – филиал Федерального исследовательского центра животноводства – ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста, Санкт-Петербург, Россия
E-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Аннотация. Создание криобанка репродуктивных клеток и тканей открывает возможности интенсификации внедрения инновационных клеточных репродуктивных технологий в практику животноводства, биомедицину, ветеринарию. Цель исследования – оценить эффекты диметилглицеролата кремния (ДМГК) на морфологию гамет и липидом ооцитов свиней, подвергшихся интраовариальной витрификации (ИОВ). Методы. Витрификации подвергались фрагменты (15 × 20 мм) яичников, которые последовательно экспонировали в криопротекторах (КПА1 и КПА2) 25 мин. и 15 мин. Состав: КПА1: 7,5 % этиленгликоля (ЭГ), 7,5 % диметилсульфоксида (ДМСО), 65 % ФСБ с 2М бычьего сывороточного альбумина (БСА); КПА2: 2,0 % ЭГ, 20 % ДМСО, 60 % ФСБ, 1М БСА, 0,5 моль/л сахарозы. Эффективность использования ДМГК в исследуемых концентрациях на криосохранность биообъектов оценивали по морфологии гамет и показателям функциональной активности липидома (морфология, локализация и интенсивность флуоресценции липидных капель, визуализированных прижизненным красителем Nile Red) в ооцитах. Результаты. 0,2 % ДМГК не индуцирует апоптотические процессы в клетках гранулезы, снижает уровень голоядернах клеток. При введении 2 % ДМГК в состав криопротекторных сред снижается доля гамет с признаками морфологической дегенерации (с 31 % до 13 %, P < 0,001). ДМГК способствует увеличению уровня гамет с позитивными показателями функционирования липидных капель: увеличивается доля гамет с диффузной локализацией (с 58 % до 83 %, P < 0,001); возрастает уровень клеток с низкой интенсивностью флюоресценции комплекса Nile red / липидная капля (с 16 % до 29 %, P < 0,05) и доля гамет с липидными гранулами (47 % против 68 %, P < 0,005). Научная новизна. Впервые идентифицированы эффекты ДМГК на морфологию женских гамет, апоптотические процессы в хроматине клеток гранулезы и функциональную активность липидома ооцитов свиней при воздействии сверхнизких температур в условиях ИОВ. Модернизированы среды для ИОВ ооцит-кумулюсных комплексов путем введения в их состав 0,2 % или 2 % ДМГК.
Ключевые слова: ооцит, свинья, липидные капли, ДНК, Nile red, витрификация.
Для цитирования: Старикова Д. А., Кузьмина Т. И. Особенности функциональной активности липидома в ооцитах Sus scrofa domesticus при интраовариальной витрификации // Аграрный вестник Урала. 2022. № 12 (227). С. 62‒72. DOI: 10.32417/1997-4868-2022-227-12-62-72.
